汉邦/汉凰科技推出羊毛甾醇纯化制备技术

背景

羊毛甾醇，化学名称为lanosterol，是一种四环三萜类化合物，分子式为C₃₀H₅₀O，为白色无臭粉末。羊毛甾醇主要存在于羊毛脂非皂化物中，而有最新研究发现，植物中也存在羊毛甾醇合酶基因。中国科学院植物研究所漆小泉团队的研究表明，植物羊毛甾醇合酶基因广泛分布于33个科、46个植物物种中，主要存在于双子叶植物中。

在生物合成的途径中，羊毛甾醇是胆固醇生物合成的关键中间体。在动物与真菌中，从2,3-环氧鲨烯生成羊毛甾醇，再进一步合成胆固醇，其在生物体内具有重要的生理功能。作为一种重要的化学合成中间体，羊毛甾醇通常被用于合成其他复杂甾体激素类药物，也可作为合成维生素D及其衍生物的起始原料之一。

羊毛甾醇本身也在多个领域展现出独特的价值。研究表明，它具有抑制白内障形成的特殊能力，能够防止晶状体混浊，甚至逆转已形成的晶体蛋白聚集。在更广泛的应用中，羊毛甾醇已成为化妆品、医药和化工行业中的重要原料。特别是在化妆品领域，羊毛甾醇以其卓越的渗透性、吸水性和润滑性能备受青睐。它主要作为高档化妆品、唇膏、口红等产品的添加剂，因其独特的结构和功能而具有可观的市场价值。

羊毛甾醇的获取主要依赖于天然提取和生物合成两大途径。其天然提取的来源集中于羊毛脂，该途径成本相对低，来源也最广泛，但也容易混入杂质，产物的后处理难度大，不利于后续的高附加值利用。羊毛甾醇的生物合成途径的研究受到广泛的关注，例如上海交通大学谭在高团队首次在大肠杆菌中合成羊毛甾醇。

正是由于羊毛甾醇的来源相对复杂，高效分离出高纯度羊毛甾醇成为了技术链条中的最大挑战。现有的结晶、蒸馏、萃取等技术各具特点，但均面临显著瓶颈。制备液相色谱法因其良好的选择性、高效性、重现性以及易于放大的特点，成为了羊毛甾醇纯化制备的新选择，尤其适用于分离结构相似杂质（如二氢羊毛甾醇），以获得超高纯度的产品。此次我们将与您分享高压制备液相色谱在羊毛甾醇分离纯化中的应用。

实验案例

客户提供的羊毛甾醇粗品为白色固体，易溶于二氯、四氢呋喃，微溶于乙醇，不溶于水。客户提供的分析谱图显示，目标组分的含量为67%左右。要求纯化后纯度＞99%，单杂＜0.5%。

表1.分析方法

仪器设备	NS4201二元液相色谱系统
色谱柱	Hedera ODS-2（4.6×250 mm，5 μm）
检测器	210nm
洗脱方法	甲醇：乙醇：水=65%：35%，等度洗脱
流量	1 mL/min
进样量	20 μL（样品浓度1.75 mg/mL，乙醇溶解）

经色谱柱筛选，确定使用Hedera ODS-2进行分析。结果如图1所示，对照客户分析结果，各组分实现基线分离，目标峰峰形良好。

图1.样品分析结果

延续分析方法，考虑到样品易溶于四氢呋喃，使用四氢呋喃+水作为流动相体系。

表2.提高上样量方法

仪器设备	NS4201二元液相色谱系统
色谱柱	Hedera ODS-2（4.6×250 mm，10 μm）
检测器	210nm
洗脱方法	四氢呋喃：水=55%：45%，等度洗脱
流量	1 mL/min
进样量	100 μL（样品浓度9.1 mg/mL，四氢呋喃溶解）

结果如图2所示，可以基线分离，可以继续提高载样量。

图2.提高上样量结果

参照上述方法，将载样量提高3倍进行制备尝试。

表3.提高上样量方法-2

仪器设备	NS4201二元液相色谱系统
色谱柱	Hedera ODS-2（4.6×250 mm，10 μm）
检测器	210nm
洗脱方法	四氢呋喃：水=54%：46%，等度洗脱
流量	1 mL/min
进样量	330 μL（样品浓度9.1 mg/mL，四氢呋喃溶解）

图3. 提高上样量方法结果-2

对以上制备结果中目标峰进行馏分收集，合并后浓缩，对所得馏分进行分析检测，目标组份纯度可达99%以上，单杂＜0.5%，满足要求。

本案例展示了汉凰科技NS4000系列高压制备液相色谱系统在羊毛甾醇纯化中的典型应用，搭配汉德的反相色谱柱实现了较好的分离效果，体现了公司制备工艺开发能力，为用户提供纯化工艺的优质解决方案。针对相关需求用户，我们有如下配置推荐，为您的分离纯化工作保驾护航！

表4实验室推荐配置

设备主机	NS4201二元液相色谱系统
色谱柱	Hedera ODS-2，10μm，4.6×250mm
自动进样器	AS8001自动进样器
馏分收集器	NC6010矩阵式馏分收集器

• 可实现无人值守的全自动化制备液相配置
• 适用于天然产物或合成产物，及杂质分离的色谱柱及填料
• 系统具备优秀的线性放大效果

方便快捷的色谱工作站，安全可靠的参数监控和安全防护功能